L5178Y 小鼠**瘤細(xì)胞
細(xì)胞系特征
種屬:小鼠
組織來源:**瘤
生長特性:懸浮生長
形態(tài)特征:**母細(xì)胞
描述: 這株細(xì)胞是L5178Y-S的衍生株
培養(yǎng)條件:
完全培養(yǎng)基:含1.5g/L 碳酸氫鈉, 4.5g/L 葡萄糖, 4mM L-谷氨酰胺的DMEM,90%;FBS,10%。添加 01% Pluroni(聚醚)。.
培養(yǎng)條件:37.0C carbon dioxide(CO2),5%
傳代方法:
收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。
(一)如果細(xì)胞未長滿,用75%酒精噴灑整個瓶**后放到超菌臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,吸出培養(yǎng)液,僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
(二)如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml完全培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
注意:傳代后一瓶用我們的培養(yǎng)基,一瓶用你們的,以免細(xì)胞不適應(yīng)而造
成生長不好。